遲發性超敏發應檢測

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遲發性超敏反應檢測概述

遲發性超敏反應（Delayed-Type Hypersensitivity, DTH）是機體免疫系統對特定抗原產生的IV型超敏反應，主要由T淋巴細胞介導，通常在接觸抗原后24-72小時內出現炎癥反應。這種反應與過敏性疾病、自身免疫病、感染性疾病（如結核病）及疫苗接種后的免疫應答密切相關。檢測DTH不僅有助于評估細胞免疫功能狀態，還能輔助診斷接觸性皮炎、結核感染等疾病，并為器官移植排斥反應的監測提供依據。其檢測的核心在于通過特異性抗原刺激，觀察局部組織或血液中免疫細胞的反應強度。

檢測項目

遲發性超敏反應的檢測項目主要包括：結核菌素皮膚試驗（TST）、斑貼試驗、淋巴細胞轉化試驗（LTT）以及細胞因子檢測（如IFN-γ釋放試驗）。TST通過皮內注射結核菌純蛋白衍生物（PPD），觀察硬結大小判斷結核感染或疫苗接種后的免疫記憶；斑貼試驗用于檢測接觸性過敏原；LTT和細胞因子檢測則通過體外培養淋巴細胞，分析其增殖能力或分泌的炎癥因子水平。

檢測儀器

DTH檢測涉及多種精密儀器：
1. 酶標儀：用于ELISA法檢測血清或培養液中的細胞因子（如IFN-γ、IL-2）；
2. 流式細胞儀：分析淋巴細胞亞群及活化標志物（如CD4+/CD8+比值）；
3. 熒光顯微鏡：觀察組織活檢標本中的炎性細胞浸潤；
4. PCR儀：檢測抗原特異性T細胞受體基因表達；
5. 皮試測量尺：精確測量皮膚硬結直徑（如TST結果判定）。

檢測方法

常用檢測方法分為體內和體外兩類：
體內檢測法：包括經典的皮內注射試驗（如TST）和斑貼試驗，直接觀察局部紅腫、硬結等反應；
體外檢測法：
- 淋巴細胞增殖試驗：通過3H-TdR摻入法或CFSE染色法量化T細胞增殖；
- ELISpot技術：檢測單個細胞分泌的IFN-γ斑點；
- 多重液相芯片技術：同時分析多種細胞因子的表達譜。

檢測標準

DTH檢測需遵循和國內標準：
1. 結核菌素試驗：依據WHO《結核感染診斷指南》，硬結直徑≥5mm為陽性；
2. 斑貼試驗：采用接觸性皮炎研究組（ICDRG）評分標準；
3. IFN-γ釋放試驗：參照美國CDC和CLSI指南，以抗原刺激后的IFN-γ濃度≥0.35 IU/mL為臨界值；
4. 實驗室質量控制：符合ISO 15189醫學實驗室認可要求，確保試劑批間差＜15%，重復性CV值＜10%。

通過規范化的檢測流程和標準化的結果判讀，遲發性超敏反應檢測可為臨床提供可靠的免疫狀態評估依據，尤其在結核病篩查、過敏原診斷及免疫功能監測中具有不可替代的價值。